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實(shí)驗(yàn)新手來看:酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)中需用試劑的配制方法

更新時(shí)間:2014-04-17 點(diǎn)擊量:2054

    一項(xiàng)酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備有著這樣那樣的要求,在實(shí)驗(yàn)中除了試劑盒的準(zhǔn)備還有緩沖劑、稀釋液等等需要我們自己動(dòng)手來配制,可是這些配制會(huì)對(duì)許多的實(shí)驗(yàn)新手朋友們會(huì)照成一個(gè)很大的困擾,所以今天上海恒遠(yuǎn)這里就來朋友們說一說實(shí)驗(yàn)中需用試劑的配制方法。
1、包被緩沖液:
NaHCO3    1.59克
NaHCO3  2.93克
加蒸餾水至1000ml
2、實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O  2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%   0.5ml
加蒸餾水至1000ml
3、實(shí)驗(yàn)稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
4、實(shí)驗(yàn)終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
5、底物緩沖液:
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)   25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
6、實(shí)驗(yàn)TMB使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2               32μl
7、實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2              2μl
8、實(shí)驗(yàn)封閉液:
牛血清白蛋白(BSA)   5克
加洗滌緩沖液至100ml。
上海恒遠(yuǎn)提醒注意事項(xiàng):
    實(shí)驗(yàn)操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時(shí)候防止加入的試劑混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔,嚴(yán)防交叉污染。
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